混合BAC基因文庫的建立與篩選目標克隆技術取得進展
BAC基因文庫無論是在植物還是動物中是廣為應用的一個工具,對基因克隆、基因組測序及功能基因組學研究中起了重要作用。在后基因組時代,BAC文庫對于基因克隆及有效保存遺傳材料仍有很大的實用價值。 傳統的BAC文庫建立一般需要將相關克隆一個一個置入至96孔或384孔板中保存,對于基因組的較大的生物則需要有較大的超低溫儲存空間, 同時其操作亦需要大型移液平臺(機器人)等條件。混合BAC基因文庫(non-gridded BAC library)的制備相對較為簡單,可節省大量的超低溫儲存空間,但是篩選目標克隆是一個技術難題。本所大豆分子育種團隊夏正俊研究員與日本生物資源研究所合作成功制備了一個大豆基因組5.2倍的混合BAC基因文庫,并建立一套集系統稀釋、PCR、多克隆混合挑取等實用技術為一起的目標克隆快速篩選與回收技術。該技術理論上適用于所有物種的混合BAC基因文庫的篩選體系,有助于應用技術手段來保存重要遺傳資源。
該文已在線發表于Analytical Biochemistry,同時,在ScienceDirect上可在線瀏覽作者對本文原聲解說(AudioSlide)。
Xia Z, Wu H, Watanabe S, Harada, K. 2013. Construction and targeted retrieval of specific clone from a non-gridded soybean BAC library Analytical Biochemistry. In Press. Available online 1 October 2013

Figure 2. 大豆混合BAC文庫(Non-gridded)的篩選程序
附件下載:
吉公網安備22017302000214號